动物源PCR技术在动物疫病检测的应用

巧亦捷（ingeNova）是翊新诊断技术（苏州）有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌，以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测，非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测，牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测，人畜共患病核酸检测，以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台，巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。翊新诊断技术（苏州）有限公司由微流控技术领域国际**周朋博士创立。公司依托先进的薄膜微流控技术开发一体化、智能化的快速、便捷的POCT体外分子诊断解决方案。针对动物疫病的早期诊断，公司以市场需求为出发点，开发出了低成本、无污染、能够实现真正意义上“全自动，全封闭，样本进，结果出”的薄膜微流控芯片技术和可以用于动物疫病现场快速诊断的分子检测系统，从而为动物疫病的现场诊断提供更加便利的检测手段。目前已开发非洲猪瘟检测、宠物呼吸道多联检测、宠物消化道多联检测等多种试剂及检测方案。PCR通过样本中的基因信息进行分析，病原体诊断试剂只会去捕捉该病原体的基因，并对其进行大量扩增。动物源PCR技术在动物疫病检测的应用

说PCR仪(尤其是实时荧光PCR仪)是动物诊断工具的中流砥柱毫不为过。然而，即时、快速和准确的检测是广大兽医站和养殖场对检测仪器更高的诉求。面对传染性疾病，用户对便携、易操作、准确性高、成本相对低廉的检测设备需求更为迫切。事实上，以微流控芯片作为耗材，搭配后端定量PCR的检测在临床检测领域已有成型产品——即巧亦捷全自动薄膜微流控快速核酸检测一体机。它实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成，样本进，结果出，检测时间短，全程无需专业技术人员参与，可实现基于病症的多项目联检，特别适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。苏州全自动PCR核酸检测巧亦捷核酸检测一体机的灵敏性和特异性上的优势，像犬猫的呼吸道、消化道和贫血等疾病的诊断和鉴别诊断。

目前，市面上的宠物用分子检测平台普遍存在操作复杂，单价偏高，灵敏度不佳等问题，巧亦捷依托于自主研发的薄膜微流控技术，经多年沉淀，研发出全自动快速核酸检测一体机及多种配套检测试剂，仪器自动进行核酸提取和PCR扩增，让使用者将样本加入薄膜囊袋中就可上机进行核酸检测，且支持多重联检功能，一次可检测多种病原体。多重宠物检测试剂除了可解决操作的复杂性问题，也由于采用常规的多重PCR策略，可大幅降低检测试剂的费用。

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。国外已将PCR技术广泛应用于犬瘟、犬细小、弓形虫等致病菌的检测，从根本上突破了免疫学间接检测的局限。

在宠物医疗中，目前病毒检测主要包括胶体金检测（试纸）和PCR检测。两者的区别：胶体金是针对病毒蛋白质的检测，PCR检测是针对病毒核酸的检测。病毒蛋白质和病毒核酸对于病毒来说都是独特的，因此它们都可以确定病毒的身份。但目前医学上无法进行病毒蛋白质的扩增，因此当样本中病毒量少的情况下，就有可能无法找到病毒；而PCR病毒核酸检测的关键就在于可以将核酸进行不断地复制和扩增，所以PCR检测的灵敏度就更高，更容易在样本病毒量相对少的情况下更早地确认病毒。假设一个样本病毒量在10万以上，胶体金技术和PCR技术可以同时检测确诊阳性；但如果样本病毒量低于10万，则只能依靠PCR技术。PCR检测正越来越多的被动物临床医师所接受，并广泛应用于动物临床疾病诊断。苏州全自动PCR核酸检测

巧亦捷核酸一体机灵敏度高，可以做到早期诊断，实现及时诊疗，减少患病动物痛苦，获得更好的疗效。动物源PCR技术在动物疫病检测的应用

绝大多数PCR检测的操作分为：样本采集→样本处理→核酸提取→上机检测四个步骤，在样本的存放和处理，特别是核酸的提取和扩增过程中，很容易造成PCR实验室的污染，从而造成结果假阳。巧亦捷核酸检测一体机全自动核酸提取，手工操作时间极短：将样本置于薄膜囊袋中进行核酸的释放和扩增，一步直达，短时间出结果。既减少了核酸提取的工作量，缩短了检测时间，又极大降低了污染发生的几率。**小化人为干预带来的操作误差，降低污染的可能性。是市面上自动化程度比较高的多重病原体解决方案。动物源PCR技术在动物疫病检测的应用