江苏动物用PCR荧光探针法

宠物的健康对于宠物主人来说至关重要，而作为宠物医疗诊断领域的一种重要技术，PCR（聚合酶链反应）检查在宠物的健康管理中扮演着重要角色。本文将探讨PCR检查的优势、适用范围以及何时应该考虑进行PCR检查。PCR检查的优势PCR检查是一种高度敏感和特异性的分子生物学技术，具有以下优势：高度敏感性：PCR可以检测到目标DNA或RNA序列的微量存在，即使在样本中只有极少量的病原体也能被检测出来。即在患病初期，或恢复期复查时，使用PCR检测能准确快速的定位病原体，方便制定更为准确的诊疗方案。高度特异性：临床中，很多疾病的表征相似，若只依赖体格检测或普通血检等，很难判断具体的致病原因，但PCR检测结果准确可靠，可以准确区分不同的病原体，避免误诊和漏诊的可能性。快速性：PCR检测通常能在几小时内得出结果，使得医疗诊断更加迅速和及时。多样性：PCR技术可以用于检测各种不同类型的病原体，包括细菌、病毒、**等，适用范围范围广。且巧亦捷核酸检测系统支持多重联检技术，一次可检测多种病原体，检测效率更高。使用范围PCR检查在宠物医疗诊断中具有范围广的应用范围，包括但不限于以下几个方面：感*性疾病诊断：PCR可用于诊断宠物感*性疾病。PCR在常见传染病、**、遗传病、寄生虫病、优生优育、法医学等领域中有相当高的实际应用价值。江苏动物用PCR荧光探针法

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。江苏动物用PCR荧光探针法宠物医疗服务包括为宠物提供疾病诊疗和日常保健服务，是宠物行业中*次于宠物食品的第二大细分行业。

当犬猫的一些疾病处于潜伏期时，该阶段动物体内的病原体含量过低。而目前市场上的一些检测工具主要检测宠物体内是否产生对抗某种病原的抗体，虽然快速，但在初期传染时，宠物免疫系统尚未产生抗体，所以检测出现伪阴性，进而延误诊疗。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一体机则可以很好的解决这一问题，即便处于疾病潜伏期，巧亦捷核酸一体机也可以得到准确的检测结果，做到早期诊断，实现及时诊疗，减少患病动物痛苦，获得更好的疗效。预后评估，监控诊疗效果。

巧亦捷核酸检测一体机能“稳、准、快”的检测出禽病。以犬瘟为例，CDV经由鼻、咽和上呼吸道侵入机体后首先在其附近的淋巴结和扁挑体中增殖，动物表现为ZUI初的体温升高和白细胞减少(主要是淋巴细胞减少)。传染第、一周会出现病毒血症，通过血液循环，CDV散布到全身的淋巴器1官、骨髓和上皮结构的固有膜，身体的所有分泌物中开始向外排毒。因此在病毒传染初期是无法在眼鼻分泌物中采集到病毒的，即便有少量病毒存在，胶体金试纸板也很难检测出正确的结果。这是由于胶体金试纸板上包被的抗体需要和特异抗原结合后再和预先包被的二抗结合才能显示结果，这其中需要的抗原（病毒）量较多。而PCR检测是将抗原进行扩增，只要存在抗原就可以通过特异性引物进行扩增，产物经琼脂糖凝胶电泳，可见到预期大小的DNA条带出现，从而对病原体的基因组片段作出鉴定。因此，我们更推荐兽医师们使用巧亦捷核酸检测一体机。巧亦捷核酸检测一体机的灵敏性和特异性上的优势，像犬猫的呼吸道、消化道和贫血等疾病的诊断和鉴别诊断。

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）的作用下，由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应，三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内，以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物，第一步，模板DNA变性，以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物，目的基因作为模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性，使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步，模板DNA与引物退火（复性），模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃，引物与模板DNA单链互补配对。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环，2-4分钟即可完成一个循环，2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍，从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制，因此PCR反应具有高度特异性。宠物IVD检测是宠物医院必备手段，其中PCR检测目前是ZUI准确的检测方法。江苏动物用PCR荧光探针法

常用的qPCR方法有荧光染料法（SYBR Green I）和探针法（TaqMan）。江苏动物用PCR荧光探针法

经过多年的科研，PCR技术应用于动物疫病的检测和诊断中，具有特异性高和便于操作等特点，得到了宽泛的临床应用。该技术能够在比较短的时间内使基因进行快速的扩增，从而使微量的基因检测在临床中得到应用实践。在PCR技术实际应用的过程中，其优点主要包括以下几方面。首先，操作性较强，技术能够简单的应用于实际的工作中。其次，高效的扩增结果，能够实现成果的转化。***，特异性较高，技术性较强。现阶段，该技术能够在很短的时间内实现快速扩张的形势使微量基因得到快速的检测。江苏动物用PCR荧光探针法