江苏糖原染色试剂盒产品介绍

染色的原理和临床意义：原理：粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶（peroxidase，POX）能将底物过氧化氢分解，产生新生态氧，它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化，显棕色四甲基苯醌二胺，再加入亚硝基铁**与联苯胺蓝结合，可形成稳定的蓝色颗粒，定位于细胞浆内酶所在的部位。临床意义： 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别：急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应；急性粒细胞白血病　原粒细胞POX染色呈局灶分布的阳性反应；急性早幼粒细胞白血病　颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应；急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。江苏糖原染色试剂盒产品介绍

糖原D-PAS染色液注意事项：1、切片脱蜡应尽量干冷，否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时温度以18～22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气，使用前较好提前取出恢复到在室温后，避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。安徽口碑好的糖原染色试剂盒厂家直销该依据切片厚薄、组织的类别等决定。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能较好地保存糖原，但有使糖原流动到细胞一侧的现象，多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存，是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能**白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此较好不单独使用乙醇固定，以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如经消化处理的切片染色阴性，不经消化处理的切片染色阳性，即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠（钾）溶液配置后，不能保存，因此，必须现配现用，用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。常需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行特殊染色。

PAS染色试剂配制及染色方法：1.材料与方1.1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例，均来自我室实验材料。1.2 主要试剂1.2.1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液，其配方：无水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3 过碘酸溶液 0.5g过碘酸（HIO）溶于100mL蒸馏水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：过碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸钠0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 无色品红液（Schiff氏液） 在三角烧内加入蒸馏水500mL，煮沸后，在保持微沸的情况下，加入碱性品红2.5g，并不断摇动约5min（勿使之沸腾），使碱性品红彻底溶解（溶解液为深红色）。冷却到50℃时，过滤，加入1N盐酸50mL，再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g，塞住瓶口，摇动容器以充分混合（此时颜色明显变淡），然后避光放置或冰箱内24h。故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。浙江品质好的糖原染色试剂盒厂家供应

可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。江苏糖原染色试剂盒产品介绍

染色的原理和临床意义：在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理，同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间，较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞，因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒－单核细胞白血病 该染色法在急性粒－单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞，甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应，因此酯酶双染色反应在急性粒－单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。江苏糖原染色试剂盒产品介绍