苏州生殖疾病动物模型建模
引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰。技术实现要素:针对上述现有技术,本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡,引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰”这一原理,使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型,并对比各种方法间的优劣性,筛选出顺铂比较好的浓度及给药时间,为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型比较好剂量提供了一种操作简单,成功率高,结果可靠的实验方法。本发明是通过以下技术方案实现的:一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法:将剂量为按体重一日2~3mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:连续施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:将剂量为按体重4~6mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。进一步地,可将顺铂溶于%氯化钠溶液配置成顺铂注射液,然后注射。所述顺铂,可市场常规购买得到,比如齐鲁制药公司生产的顺铂。进一步地,注射期间每天称量大鼠体重,注射后每周称量2次;末次注射后15天,麻醉取血检测***水平,取卵巢检测对比卵巢重量。能够准确模拟人相关特定功能与疾病特征。苏州生殖疾病动物模型建模
技术领域:本发明属于遗传学和生物技术领域,具体涉及pirb基因敲入的小鼠动物模型,还涉及上述小鼠动物模型的构建方法。背景技术:鼠源成对免疫球蛋白样受体b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人类免疫球蛋白样受体b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2,lilrb2)的同源基因,pirb基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的7号染色体近端,总大小为,编码841个氨基酸,目前鉴定出15个外显子,外显子1起始密码为atg,外显子15的终止密码子是tga(转录本:)。pirb蛋白属于i型跨膜糖蛋白,包含由六个免疫球蛋白样结构域(domain,d)组成(d1-d6)的胞外段,一个疏水的跨膜段,三个免疫受体酪氨酸依赖的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一个itims样序列组成的胞内段。理论上讲,pirb的分子量约为92kd,但是western-blot分析中,pirb经常位于105kd处,因为pirb是糖蛋白。以往研究发现,pirb在免疫系统和中枢调节中均发挥重要作用。在免疫系统中,pirb在许多造血细胞都有表达,包括b细胞、肥大细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突细胞,但是在胸腺细胞、成熟的t细胞和自然杀伤细胞不表达。镇江品牌疾病动物模型建模哪里可以做动物模型?
缺点:该移植模型的原发出现与转移发生之间时间间隔短,不利于药物药效研究;且细胞为鼠源,与人类有一定的差异。2异种移植模型异种移植模型是将人类的细胞或组织移植入免疫缺陷型实验动物体内。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠,例如无胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般来说,免疫缺陷程度越高,成瘤性越好。的相关研究中,人源细胞系异种移植(cell-line-derivedxenograft,CDX)模型和患者组织异种移植(patient-derivedxenograft,PDX)模型已得到广泛应用。CDX模型方法:将5×106的人A375黑色素瘤细胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹侧的双侧,成功构建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法:有研究者将93个新鲜的患者组织切成2×2×2mm3碎片的大小,皮下接种6周大的NOD/SCID雌性小鼠,建立PDX模型。优点:保留了病人的组织学和遗传学特征,可模拟溃疡状态对人类黑色素瘤预后的影响。缺点:此模型移植后的潜伏期长,连续传代后鼠基质被人类基质替代,移植率可变,免疫系统受损,有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫细胞功能的缺乏。三、转基因小鼠模型可以通过异位表达基因,引入特定的致突变或灭活抑制基因来对小鼠进行转基因黑色素瘤模型的构建。
动物模型名称:皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤,致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准:a.皮肤大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐**素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑;致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清;致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解模型应适用于多数研究者使用,容易复制,实验中便于操作和采集各种标本。
图2是从侧面展示的压迫元件插入椎间孔的结构示意图。图3是术后大鼠四肢表现情况。图4是术后28天大鼠的双下肢缩足阈值变化曲线图。图5是重复经颅磁刺激对大鼠背根神经压迫模型的影响。具体实施方式以下通过具体的实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明,而不是限制本发明的范围。实施例1、模型的制备1、腹腔注射1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮肤,俯卧位固定于动物手术台上,铺无菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左侧作一2-3cm纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌至横突上方,暴露腰4椎间孔,腰5椎间孔(椎旁肌可用自制拉钩保持分离状态)。3、将2根***端11为4mm,第二端12为2mm,直径为,第二端12置于腰4椎间孔及腰5椎间孔外。如图1和2所示,可以看到腰4锥体1、腰5锥体2、腰6锥体3、l型棒10、腰4神经根4和腰5神经根5的位置关系。当l型棒10的***端11插入腰4锥体1的腰4椎间孔后,会对腰4神经根4起到压迫作用;同样的,当l型棒10的***端11插入腰5锥体2的腰5椎间孔后,会对腰5神经根5起到压迫作用。从而达到模拟腰椎间盘突出压迫神经根的目的,制备得到大鼠慢性背根神经压迫模型。动物模型作为人类疾病的缩影。虹口区视觉疾病动物模型建模
确定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。苏州生殖疾病动物模型建模
可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例3建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液25ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中。苏州生殖疾病动物模型建模
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